Antíoco, rei de Comagena, uma região da Síria, anexada ao Império Romano, que serve fielmente a Tito e mantém seu título real, está apaixonada por Berenice. Há muito que ele espera a oportunidade de conversar com Berenice e descobrir qual é a decisão dela: se ela está pronta para se tornar esposa de Tito, Antíoco deixa Roma. Antíoco, ao se encontrar com ela, admite que a amou todos os cinco anos desde que a conheceu, mas Berenice responde que ela sempre amou apenas Tito e o amor é mais caro para ela do que o poder e a coroa do imperador.
Berenice conversa com sua confidente Foinika e sugere que será difícil para Titus contornar a lei. Mas Berenice acredita em Tito e em seu amor e espera que ela seja recebida pelo "senado arrogante".
Enquanto isso, Titus pergunta a seu confidente Pauline o que eles acham em Roma sobre ele e Berenice. O imperador não está interessado na opinião de uma corte servil e nobres - eles estão sempre prontos para suportar qualquer capricho de César, pois suportaram e aprovaram "toda a baixeza de Nero". Titus está interessado na opinião do povo, e Paulin responde que, embora Berenice seja digna de beleza como uma coroa, ninguém na capital "gostaria de chamá-la imperatriz". Nenhum dos antecessores de Titus violou a lei do casamento. E mesmo Júlio César, que amava Cleópatra, "não podia chamar o egípcio de esposa". Tanto o cruel Calígula como o "abominável" Nero, "tendo corrigido tudo o que as pessoas honram há séculos", respeitavam a lei e "eles não viam o casamento vil com eles". E o ex-escravo Felix, que se tornou procurador da Judéia, era casado com uma das irmãs de Berenice, e ninguém em Roma gostaria de ver aquele cuja irmã havia tomado o escravo de ontem como marido. Titus admite que lutou por muito tempo com amor por Berenice, e agora que seu pai morreu e um pesado fardo de poder repousou sobre seus ombros, Titus deve se abandonar. As pessoas o observam e o imperador não pode começar seu governo violando a lei. Tito decide contar a Berenice tudo, ele tem medo dessa conversa.
Berenice se preocupa com o destino dela - o luto de Titus por seu pai terminou, mas o imperador está calado. Ela acredita que Titus a ama. Titus sofre e não se atreve a dizer a Berenice que ele deve abandoná-la. Berenice não consegue entender o que ela fez. Talvez ele tenha medo de violar a lei? Mas ele mesmo disse a ela que nenhuma lei poderia separá-los. Talvez Titus tenha descoberto o encontro dela com Antíoco, e o ciúme falou nele?
Tito descobre que Antíoco vai deixar Roma e fica muito surpreso e irritado - ele precisa de seu velho amigo, com quem eles lutaram juntos. Tito diz a Antioquia que ele deve se separar de Berenice: ele é César, que decide o destino do mundo, mas não é capaz de dar seu coração a quem ama. Roma concorda em reconhecer sua esposa apenas como romana - "qualquer, miserável - mas apenas com seu sangue", e se o imperador não se despedir da "filha do Oriente", então "diante dela o povo irado exigirá sua expulsão". Titus pede que Antíoco a informe de sua decisão. Ele quer que seu amigo, junto com Berenice, saia para o Oriente e continue sendo bom vizinho em seus reinos.
Antíoco não sabe o que fazer - chorar ou rir. Ele espera que, a caminho da Judéia, consiga convencer Berenice a se casar com ele depois que César a rejeitar. Arshak, seu amigo, apoia Antioquia - ele estará ao lado de Berenice e Titus está longe.
Antioquia tenta conversar com Berenice, mas hesita em dizer diretamente o que a espera. Sentindo que algo estava errado, Berenice exige franqueza e Antíoco a informa da decisão de Tito. Ela não quer acreditar e quer aprender tudo com o imperador. Antíoco agora proíbe se aproximar dela.
Antes de conhecer Berenice, Titus pensa no que fazer. Ele está apenas sete dias no trono após a morte de seu pai, e todos os seus pensamentos não são sobre assuntos do governo, mas sobre amor. No entanto, o imperador percebe que ele não pertence a si mesmo, ele é responsável pelo povo.
Berenice aparece e pergunta se lhe disseram a verdade? César responde que não importa o quão difícil seja para ele tomar essa decisão, eles terão que sair. Berenice o censura - ele deveria ter dito as leis romanas quando se conheceram. Seria mais fácil para ela fazer uma recusa. Tito responde a Berenice que ele não sabia como seria seu destino e não achava que se tornaria imperador. Agora ele não vive - a vida acabou, agora ele reina. Berenice pergunta do que César tem medo - levantes na cidade, no país? Titus responde que, se os "costumes do insulto do pai" causam inquietação, ele terá que forçar sua escolha "e pagar pelo silêncio do povo", e não se sabe a que custo. Berenice propõe mudar a "lei injusta". Mas Tito fez um juramento a Roma "a lei para mantê-lo", é seu dever ", não há outro caminho, e devemos segui-lo inabalável". É necessário manter a palavra, como seus antecessores mantiveram. Berenice, em desespero, censura César por acreditar que é o dever mais alto "cavar sua sepultura". Ela não quer permanecer em Roma "uma diversão para os romanos hostis e malévolos". Ela decide cometer suicídio. Titus ordena que os servos sigam Berenice e a impeçam de concluir seu plano.
A notícia do rompimento de César com a rainha se espalha por toda a cidade - "Roma se alegra, todo templo está aberto ao povo". Antíoco, empolgado - ele vê que Berenice se apressa "em imenso pesar" e requer uma adaga e veneno.
Titus encontra Berenice novamente, e ela anuncia que está saindo. Ela não quer ouvir como as pessoas estão se gabando. Titus responde que ele não pode se separar dela, mas ele não pode recusar o trono e abandonar o povo romano. Se ele tivesse feito isso e saído com Berenice, ela mesma teria vergonha de "um guerreiro sem regimentos e César sem coroa". O poder e o casamento com a rainha são incompatíveis, mas a alma do imperador não aguenta mais esse tormento - ele está pronto para morrer se Berenice não lhe jurar que não assumirá as mãos.
Antíoco aparece - durante muito tempo escondeu de César seu amor pela rainha, mas não conseguiu mais se esconder. Vendo como eles sofrem, ele está pronto para, por causa de César e Berenice, sacrificar sua vida aos deuses para que tenham misericórdia, Berenice, "envergonhada" pela grandeza das almas de ambos, vendo uma disposição de sacrificar Tito e Antíoco, implora que eles não sofram tanto. para ela, ela não vale a pena. A rainha concorda em viver em separação e pede a Tito que a esqueça. Ela chama Antíoco para esquecer o amor. A memória dos três permanecerá nos anais como um exemplo do amor mais terno, ardente e sem esperança.